Պոլիակրիլամիդ գելային էլեկտրոֆորեզի նախազգուշական միջոցներ

· պոլիակրիլամիդգելը պետք է ակրիլամիդի մոնոմերի, պոլիմերացման սկզբնական նյութի, կատալիզատորի և աղի և բուֆերային խառնուրդի իրավունքը միասին:

· ակրիլամիդիսկ BIS (N, N'- մեթիլեն կրկնակի ակրիլամիդ) մոնոմերի ձևի գել մատրիցն է:

· Ամոնիումի պերսուլֆատը սկսում է սոսինձի պոլիմերացման գործընթացը: Սոսինձի ձևակերպման համար պահանջվում է ջրի մեջ պատրաստված ամոնիումի պերսուլֆատի 10% լուծույթ: Տեղեկատվության մեծ մասը վկայում էր ակտիվ օգտագործման անհրաժեշտության մասին: Այնուամենայնիվ, 10% լուծույթը կարող է տեղադրվել 4℃ ջերմաստիճանում մի քանի շաբաթ առանց ակտիվության զգալի կորստի: Դարձրեք մինչև 10 մլ և դեն նետեք, երբ սոսինձը չի համալրվում:

Հուշում. տոկոսըակրիլամիդհաջորդականության մեջ սոսինձը և սպիտակուցը սոսինձը նույնը չէ: Եթե ​​օգտագործում եք նախապես պատրաստված ակրիլամիդ՝ BIS լուծույթ, համոզվեք, որ ձեռք եք բերել ճիշտ շիշը:

· TEMED (N, N, N ', N'- tetramethyl ethylenediamine) կատալիզատոր է, շագանակագույն շշի մեջ, դրված սառնարանում: Ավելացրեք սոսինձը լցնելուց անմիջապես առաջ:

· Էլեկտրաֆորեզում օգտագործվող պոլիակրիլամիդային էլեկտրոֆորեզով ապակիները պետք է լվացվեն ամեն անգամից առաջ և հետո: Էլեկտրաֆորեզից հետո լվանալ փափուկ խոզանակով և շորով տաք օճառի ջրի մեջ, լվանալ թորած ջրով և կանգնել չորանալու համար:

· Խոնավությունը և փոշին կարող են առաջացնել խոռոչ պոլիմերով: Էլեկտրաֆորեզից առաջ ապակե ափսեը մաքրեք ապակու մաքրիչով և սրբեք այն փափուկ խոզանակով։ Լվանալ թորած ջրով և մանրակրկիտ չորացնել թղթե անձեռոցիկով: 70% էթանոլով ողողումը թղթով սրբելուց առաջ օգնում է մաքրել և արագացնել չորացումը: Հաջորդաբար ավելացրեք ակրիլամիդի նմուշներ՝ BIS, ջուր, բուֆերային լուծույթ, ամոնիումի պերսուլֆատ, TEMED: Լավ թափահարեք և անմիջապես լցրեք։

Պոլիմերացումից առաջ անհրաժեշտ չէ գազազերծել պոլիակրիլամիդը: (Ակրիլամիդը նախկինում տեղադրվում էր վակուումում՝ փուչիկները հեռացնելու համար, քանի որ թթվածինը արգելակում է պոլիմերացումը):

Հորիզոնական սոսնձման կետի նմուշների խորհուրդներ:

· Ներքևի տուփի մեջ դրեք սև թղթի կտոր, սև ֆոն՝ որոշ նմուշի անցք ստեղծելու համար՝ ավելի պարզ տեսնելու համար:
· սոսինձով բաքով լցված բուֆեր, անմիջապես կոլոիդի վրայով:
· եթե ծայրը լույս ունի, միացրեք լույսերը, թող լույսը փայլի կոլոիդ: Նմուշը քաշեք խողովակի մեջ:
· ավտոմատ խողովակային սարքի օգտագործումը:
· 10-200 մյու-ում 1 հեղուկ շարժական կետ կարող է օգտագործվել նմուշի կետերի մեծ մասում: Շատ փոքր նմուշի անցքերի համար (10μ1-ից պակաս) ավելի հարմար է սոսինձի հաջորդականացման համար օգտագործվող երկար պիպետտի գլուխը:

· Նմուշի մեջ պարզապես ընկղմվել է պիպիթեր՝ դանդաղ շարժվող հեղուկը ներշնչելով: Նմուշը կարող է կպչուն թվալ գլիցերինով, և արագ մղումը կարող է օդային պղպջակներ քաշել պիպետտի գլխի մեջ:

· Նմուշները խողովակաշարի գլուխը ներշնչելուց հետո հեղուկի գլուխը նրբորեն կտեղափոխեն խողովակի եզրին կամ սրբելով թուղթը կծծեն հեղուկի գլուխը կաթիլներից դուրս: Զգույշ եղեք, որ նմուշը չծծեք:

Նմուշը դրեք նմուշի անցքի մեջ

· Մի փոքր ճնշում պահելու համար խողովակի սարքը, որպեսզի նմուշները մի փոքր շարժեն արտահոսքի հեղուկի գլուխը:
· Պիետինգի գլուխը, որը տեղադրված է բուֆերի մեջ, մի փոքր ավելի բարձր է, քան բծային անցքերը, պահպանում է դրական ճնշումը: Պիպետտի ծայրը կարող է տեղադրվել փոքր անցքի մեջ:
· Դանդաղ և անշեղորեն նմուշները դուրս են գալիս: Պիպետտի ծայրը տեղադրվում է կետային նմուշի անցքի վերևում, և նմուշը կսուզվի անցքի մեջ: Թող նմուշը խորտակվի, որպեսզի լրացնի նմուշի անցքը՝ ներս մղելու փոխարեն:
· Հեղուկ գլխով նմուշի վերջին կաթիլից հետո հեղուկը կտեղափոխվի երկրորդ ոտքը, դանդաղ բարձրացրեք հեղուկը, դուրս կգա բուֆերից

Ինչպե՞ս կատարել սոսինձի ուղղահայաց նմուշառում:

· ուղղահայաց սոսնձման կետի նմուշի անցքեր, որոնք ձևավորվել են ապակու երկու կտորների միջև: Շատ բարակ սոսինձի մեջ պիպետտի գլուխը նույնիսկ չի կարող տեղադրվել երկու ապակե թիթեղների միջև: Դիտեք գլիցերինը: Պիպետտի գլուխը դրեք նմուշի անցքի վրա, և նմուշը կսուզվի անցքի մեջ:
· կետ նմուշը առաջ, համոզվեք, որ ուղղահայաց կետը պոլիպրոպիլենային ակիլ գել նմուշի անցքը ողողված է մաքուր: Լվացեք չպոլիմերացված ակրիլամիդը և ջուրը, որը կարող է հայտնվել նմուշի անցքի հատակին: Ջուրը կարող է զգալիորեն փոքրացնել նմուշի անցքը: Օգտագործեք 25 մլ կամ 50 մլ ներարկիչ և 18 տրամաչափի ասեղ: Լցնել էլեկտրոֆորեզի բուֆերը և զգուշորեն լվանալ նմուշի անցքը:
· Դժվար է տեսնել նմուշի անցքը, բայց միևնույն ժամանակ, մնացածը հեշտ է: Եթե ​​կան ավելցուկային անցքեր, ապա նմուշի բուֆերը կարող է փորձարկվել բրոմֆենոլ կապույտով: